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          大鼠顳下頜關節軟骨細胞

          簡要描述:產品可保大鼠顳下頜關節軟骨細胞的生長狀態。本產品中已包含大鼠顳下頜關節軟骨細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠顳下頜關節軟骨細胞的體外培養。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

          • 產品型號:GOY-01X1425
          • 廠商性質:科研
          • 更新時間:2023-04-17 08:58:57
          • 訪  問  量:10

          詳細介紹


          大鼠顳下頜關節軟骨細胞

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          產品名稱:大鼠顳下頜關節軟骨細胞

          貨號:GOY-01X1425

          分類:原代細胞

          2.組織來源:關節軟骨組織

          3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

          4.細胞簡介:大鼠顳下頜關節軟骨細胞分離自顳下頜關節軟骨組織,顳下頜關節又稱顳頜關節”或下頜關節”。由下頜頭與顳骨下頜窩和關節結節組成,左右合成一聯合關節,主理張口閉口和咀嚼運動。關節囊松弛,側方為內、外側韌帶所加強。囊內的關節盤呈卵圓形,由纖維軟骨組成,區分為前、中、后三部分。上面呈鞍狀,前凹后凸,與關節結節和下頜窩的凸凹輪廓相對應;下面凹正對下頜頭,周緣與關節囊相接,前緣與穿過關節囊的翼外肌腱相連。關節盤將關節腔分成上、下兩半。關節外更有蝶下頜韌帶(蝶棘至下頜小舌)和莖突下頜韌帶(莖突至下頜角)予以加固。關節軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架,這種框架呈半環形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質上,上端朝向關節面,這種結構使關節軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來,同時當受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關節軟骨的正常代謝。關節軟骨沒有神經支配,也沒有血管,其營養成分必須從關節液中取得,而其代謝廢物也必須排至關節液中,關節軟骨的這種營養代謝必須通過關節運動,使關節軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關節運動對于維持關節軟骨的正常結構起重要的作用。關節軟骨細胞位于關節軟骨陷窩內。幼稚的關節軟骨細胞位于關節軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關節軟骨表面平行,越向深層的關節軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數量不一的脂滴。成熟的關節軟骨細胞多2-8個成群分布于關節軟骨陷窩內,這些關節軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關節軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,關節軟骨細胞收縮為不規則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的關節軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

          5.方法簡介:公司實驗室分離的大鼠顳下頜關節軟骨細胞采用膠原酶聯合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

          6.質量檢測:公司實驗室分離的大鼠顳下頜關節軟骨細胞經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

          7.培養信息: 培養基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin等 換液頻率 每3-4天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 梭形、多角形 傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態 培養條件 氣相:空氣,95%CO25%



          培養操作

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          大鼠顳下頜關節軟骨細胞1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
          2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      
          1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
          2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
          3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
          4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
          3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
          1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
          2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
          3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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