大鼠腓腸肌細胞

簡要描述：產品可保大鼠腓腸肌細胞的生長狀態。本產品中已包含大鼠腓腸肌細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠腓腸肌細胞的體外培養。本產品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產品型號：GOY-01X1427
廠商性質：科研
更新時間：2023-04-17 09:01:13
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大鼠腓腸肌細胞

產品名稱：大鼠腓腸肌細胞

貨號：GOY-01X1427

分類：原代細胞

2.組織來源：骨骼肌組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：大鼠腓腸肌細胞分離自小腿肌肉組織；腓腸肌位于小腿后面的皮下，是一個淺表的肌肉，當人體站立時，可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌。腓腸肌為小腿后側群淺組肌肉，有內、外二頭，內側頭起自股骨內側髁上的三角形隆起，外側頭起自股骨外側髁的近側端，在二頭的深面各有一滑膜囊。腓腸肌的二肌腹增大，在腘窩下角彼此鄰近，所成夾角多為25°～30°，此肌下行與比目魚肌移行為跟腱，止于跟骨結節。腓腸肌的動脈發自腘動脈、靜脈與動脈伴行，注入腘靜脈或小隱靜脈。腓腸肌的神經全部來自脛神經。包括內、外側肌神經。腓腸肌在行走及站立時能提足跟向上，直立時，腓腸肌和比目魚肌都參加強固膝關節，并調節小腿和足的位置。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕，可以切取腓腸肌內側頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉。腓腸肌還可影響足的縱弓，該肌癱瘓足縱弓將加深。該肌由脛神經支配，股骨髁上骨折時，因腓腸肌收縮遠側端常自后移位。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉。腓腸肌細胞屬于骨骼肌細胞的一種，骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段，叫做一個肌節。骨骼肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠腓腸肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠腓腸肌細胞經α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml）培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等換液頻率每2-3天換液一次生長特性貼壁細胞形態成纖維細胞樣傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

培養操作：

大鼠腓腸肌細胞1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓脫落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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